Baggrundsteknologi
Cagrilintide er en ny langtidsvirkende acyleret amylinanalog. Som en ikke-selektiv agonist af amylinreceptoren (AMYR) og den calcitonin G-proteinkoblede receptor (CTR), er det et cyklisk polypeptid sammensat af 38 aminosyrer. Dens sekvens indeholder 38 aminosyrer og et par disulfidbindinger. Cagrilintide kan reducere kropsvægt og fødeindtagelse betydeligt og har potentiale inden for fedmeforskning. Amylin er et andet hormon relateret til sult og mæthed uden for GLP-1-signalvejen.
Cagrilintide kan reducere energiindtaget, regulere madvalg og præferencer, udøve en glukoseregulerende effekt ved at blive udskilt sammen med insulin, hæmme postprandial glukagonfrigivelse og forsinke mavetømning. Det har åbenlyse fordele i behandlingen af diabetes, fedme, metabolisk syndrom, hjerte-kar-sygdomme og andre aspekter og har brede efterspørgsels- og anvendelsesmuligheder.
Cagrilintides kemiske strukturformel
Grundlæggende information
engelskName：Cagrilintide
Firmanummer：GT-F064
CAS：1415456-99-3
Ssekvens：γ-Glu-Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Glu-Phe-Leu-Arg-His-Ser-Ser-Asn-As n-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Pro-NH2(Disulfidbridge:cys4-cys9)
MolekulærFormula：C194H312N54O59S2
MolekulærVægt：4409.01
Råvarer brugt tilCagrilintide
Syntetisk rute
Cagrilintid-forberedelsesdiagram
(1)Udarbejdelse afCagrilintidePeptidharpiks
Tag 1,5 mmol af den første beskyttede aminosyre og 1,5 mmol HOBT, opløs med en passende mængde DMF og afkøl til 0~15°C; tag yderligere 1,5 mmol DIC, tilsæt det langsomt til DMF-opløsningen af den beskyttede aminosyre under omrøring, og omrør reaktionen i 10 minutter ved 0~15°C for at opnå en aktiveret beskyttet aminosyreopløsning, som sættes til side.
Tag 0,5 mmol aminoharpiks (substitutionsgrad 0,42 mmol/g), kvæld den med DMF-opløsning i 60 minutter, afbeskytt den med 20% Pip/DMF-opløsning i 30 minutter, vask og filtrer for at opnå den harpiks, der skal reageres.
Tilsæt den aktiverede først beskyttede aminosyreopløsning til harpiksen, der skal reageres, udfør koblingsreaktionen ved 25~35 ℃ i 120~300 minutter, filtrer og vask for at opnå harpiksen indeholdende 1 beskyttet aminosyre: Fmoc-Pro-Resin
Ved at bruge samme metode som ovenfor får du sekventielt adgang til de tilsvarende 2. til 38. beskyttede aminosyrer eller fragmenter nævnt ovenfor:Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-His(Trt)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Ala-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu-OtBu，Mono-tert-butyl eicosandioat, hvilket giver 4,98 g carmegliptin peptidharpiks
(2)Tilberedning af råolieCagrilintide lineært peptid
Tag 4,49 g carfilzomib peptidharpiks, tilsæt TFA blandet opløsning, forholdet mellem den blandede opløsning er TFA:EDT/Tis/phenol/H2O = 87,5:2,5:5:2,5:2,5, og doseringen er 8 ml pr. gram harpiks; omrør reaktionen ved 20~30°C i 3 timer, filtrer reaktionsblandingen med en sandkernetragt, opsaml filtratet, vask harpiksen med en lille mængde TFA 3 gange, kombiner filtraterne, tilsæt MTBE til udfældning, vask bundfaldet med MTBE 3 gange, og pump tørt for at opnå en råhvidt pulver, 08 g carb pulver. peptid.
(3)Fremstilling af rå Cagrilintide cyklisk peptidopløsning
Tag 0,50 g rå lineærCagrilintidpeptid, tilbered en rå lineær peptidopløsning i en koncentration på 5,0 mg/ml, tilsæt 5 ml DMSO-opløsning dråbevis under omrøring og reager ved 20~30℃ i 20 timer for at opnå en rå cyklisk cagrilintid-peptidopløsning.
(4)Forberedelse af raffineretCagrilintid peptid
Tag den råCarraglitid cyklisk peptidopløsning, og filtrer den med en 0,45μm blandet mikroporøs filtermembran；
Rens og klargør ved hjælp af højtydende væskekromatografi, og opsamlCarragliptin fraktioner；
Højtydende væskekromatografi blev anvendt til bufferudveksling. Hovedtoppen efter bufferudveksling blev opsamlet, og dens renhed blev påvist ved analytisk væskekromatografi. Hovedtopopløsningerne efter bufferudskiftning blev kombineret, koncentreret under reduceret tryk til opnåelse af en vandig eddikesyreopløsning af carbotid, som blev frysetørret til opnåelse af 152,18 mg raffineret carbotid med en renhed på 99,58 %, en maksimal enkelt urenhed på 0,09 %, et samlet udbytte på 31 molekylvægte og 94 7 molekylvægt.
HPLC diagram
MS diagram
Ovenstående eksempler viser, at sammenlignet med trin-for-trin koblingssynteseprocessen, har produktet opnået ved fremgangsmåden tilvejebragt ved den foreliggende opfindelse en renhed på mere end 99,0%, og hver enkelt urenhed er mindre end 0,1%, hvilket forbedrer produktkvaliteten og det samlede udbytte. Processen er enkel og nem at kontrollere, har en høj grad af industrialisering og har omfattende praktisk værdi og anvendelsesmuligheder.
Kontakt os
Telefon: +86-18986204913
Tlf.: +86-027-83338163
E-mail: info@cosperpharma.com
